液相色谱故障排查03丨为啥小瓶不能装满？

 

在上一期的视频里，

我们讨论了样品太少可能会引起不出峰的现象，

小佳牢牢地记住了这一点，

这天，她又在做实验，

小泰正好路过，发现她把样品瓶装的很满，

就问她为什么装那么多样品。

小佳认为液面太低容易吸不上样品，

为了防止这种现象的产生，所以就把瓶子装满了。

小泰告诉她，太多的话也会产生其他问题的。

凡事过犹不及，也不能装太多。

听了小泰的话，小佳感到很疑惑，

她认为虽然样品装的多，但是进样量没有变，

会有什么影响呢？

对于小佳的疑惑，小泰进行了耐心的讲解，

这个问题不能只从数学的角度考虑，

还要考虑瓶子的影响。

实际上，当瓶子里的样品过多，

进样量超过200μL，

而且盖子也盖得很紧的情况下，

吸取样品时，

瓶内液面上方就容易产生一定的负压，

导致样品无法顺利吸入。

在极端情况下，如果样品沸点较低，

当针吸取样品时，

瓶子上部气压的降低会导致液体沸点降低，

样品有可能会沸腾，在针或样品环内形成气泡，

导致进样量不准，影响样品的检测。

而要避免这种状况的产生，有三种方法。

最简单的方法是少放些样品啦，

一般来说不超过瓶子容积的3/4。

样品瓶的体积都是2mL，但最大刻度都在1.5mL，

一定程度上也在提醒你样品别超过1.5mL。

第二，可以在样品里加上内标，

因为最后样品的浓度是通过和内标的比值计算出来的，

只要比值一定，

进样量大小的误差也可以在一定程度上得到消除。

第三，很多公司都提供预开口的瓶垫，

它能够在进样时平衡瓶子内外的气压，

避免负压现象的产生。

除了这个好处外，

使用预开口的瓶垫还能避免更多可能出现的进样问题。

我们在以后的课程中再详细给大家讲解。

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