大家好,从今天起,小泰会给大家讲讲液相色谱的脱气机的原理和一些常见的问题,在讲原理之前,首先要搞清楚的几个问题是:为什么液相色谱要配脱气机?流动相里的气体来自哪里?气体为什么不好?会影响泵吗?会影响检测器吗?会影响样品本身吗?带着这些问题,来看视频吧~
质谱分析的第一步要把待分析物质离子化,对于蛋白质、多肽等大分子物质,一些离子源,如电喷雾电离(ESI)和大气压化学电离(APCI)等在电离过程中会使大分子离子发生碎裂,形成碎片。而MALDI-TOF的出现解决了这个难题,它通过引用基质分子,不产生或产生较少的碎片离子。它温和的离子化条件使它能够很好的测定蛋白质、多肽、生物多聚体和DNA等大分子物质。MALDI-TOF是通过引入基质的方式来离子化待测物分子,最常见的MALDI离子化形式是被测物分子带一个正电荷。气态的被测物离子产生后,它们的质量就通过飞行时间质谱进行分析。那么问题来了,飞行时间质谱是通过什么方法来将离子进行分离并确定每个离子的质荷比呢?
不出峰?不出峰?不出峰?为什么不出峰,且看007之大破液相危机
在上一期的视频里,我们学习了顶空进样器的基本原理,这一期会带大家更详细的了解顶空进样器的气路模块,以及在提取和注射样品的过程中,这些模块是怎样协同工作的。
热腾腾的第一期,双语字幕+重点单词标注,想弄懂顶空进样器原理,多看几遍视频吧
在上一期的视频里,我们讨论了样品太少可能会引起不出峰的现象,小佳牢牢地记住了这一点,这天,她又在做实验,小泰正好路过,发现她把样品瓶装的很满,就问她为什么装那么多样品。小佳认为液面太低容易吸不上样品,为了防止这种现象的产生,所以就把瓶子装满了。小泰告诉她,太多的话也会产生其他问题的。凡事过犹不及,也不能装太多。听了小泰的话,小佳感到很疑惑,她认为虽然样品装的多,但是进样量没有变,会有什么影响呢?这节课我们就来讲讲为啥小瓶不能装满。
在上一期里,小佳遇到了不出峰的问题,在解决的过程中,小泰问过她液面是不是太低,够不够0.5mL,小佳对这个提问一直感到很疑惑。这天,小泰来到小佳的实验室修仪器,小佳就趁此机会询问小泰如果不够,对出峰会有多大的影响。小泰告诉她通常针尖距离瓶底是有一段距离的,如果样品太少,针就有可能会触不到液面,吸不上样品引起不出峰的问题。既然样品太少不行,那放多少样品比较保险呢?
在上次的视频里,我们分享了一个液相色谱故障排查的案例,今天,我们来总结一下,小泰在整个过程中是怎样一步步判断问题所在的。